阴道毛滴虫黏附蛋白ap33基因克隆及其表达

来源 :寄生虫与医学昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tianshanfeiren

【摘要】

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通过提取取道毛滴虫mRNA,逆转录合成cDNA,PCR取到预期长度片段后,将其克隆到pUCm-T载体中进行PCR、酶切及测序分析,并与GeneBank中核酸序列进行同源性分析.再将其克隆至表达

【作者】

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黄慧聪梁韶晖秦茜潘长旺谭峰

【机构】

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温州医学院寄生虫学教研室

【出处】

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寄生虫与医学昆虫学报

【发表日期】

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2005年1期

【关键词】

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毛滴虫基因克隆阴道 puCm-T载体 SDS-PAGE 蛋白黏附同源性分析核苷酸序列 PCR mRNA cDNA 测序分析表达载体诱导表达半乳糖

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通过提取取道毛滴虫mRNA,逆转录合成cDNA,PCR取到预期长度片段后,将其克隆到pUCm-T载体中进行PCR、酶切及测序分析,并与GeneBank中核酸序列进行同源性分析.再将其克隆至表达载体PET-32a.重组子用酶切、PCR和测序鉴定后,转化大肠杆菌并以异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.从阴道毛滴虫临床分离株中扩增出927bp的ap33的基因片段,构建重组质粒PET-32a(+)-ap33;EPTG诱导后,SDS-PAGE显示表达产物的大小约50kDa.

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