【摘 要】
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目的改良构建M2型抗线粒体抗体（AMA-M2）靶基因三联体重组表达载体技术,建立检测AMA-M2的酶联免疫吸附法（ELISA）并进行评价。方法通过聚合酶链反应（PCR）扩增基因三联体BPO,构建表达
【机 构】
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深圳市人民医院医务科,深圳市人民医院检验科
【基金项目】
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深圳市科技计划资助项目（JCYJ20170307095922553）
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目的改良构建M2型抗线粒体抗体（AMA-M2）靶基因三联体重组表达载体技术,建立检测AMA-M2的酶联免疫吸附法（ELISA）并进行评价。方法通过聚合酶链反应（PCR）扩增基因三联体BPO,构建表达载体pGEX-4T-1-BPO,转入大肠杆菌BL21表达,经异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导得到重组蛋白,并通过亲和层析纯化得到目的蛋白,建立ELISA检测AMA-M2。结果获得纯度大于95%的重组蛋白;检测326例临床样本,43例原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者中有41例呈AMA-M2阳性,灵敏度为95.3
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