论文部分内容阅读
目的
研究慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的诱导性多能干细胞（iPS），细胞形态和传代的影响。
方法通过包装慢病毒pSin-GFP感染iPS，分为实验组（细胞与病毒滴度比例1 : 200）和对照组（细胞与病毒滴度比例1 : 1）感染人iPS，经过嘌呤霉素药物筛选获得单克隆，重复3次实验观察细胞形态学变化记录细胞每代克隆数，采用方差分析及t检验进行统计学分析数据结果，用免疫荧光和werstern检测iPS标志蛋白表达。
结果pSin-GFP病毒感染iPS后挑取24个单克隆细胞株，传十代后实验组（4.67±0.33）明显少于对照组（16.00±0.58）的细胞克隆数（t =17.00，P < 0.01），实验组细胞状态稳定并正常表达Oct-4、Sox2、SSEA-1、Nanog和Tra-1-60。
结论使用1 : 200的高比例慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的iPS可传代次数减少，形态学并未发生变化，其正常表达的干细胞标志性蛋白。