【摘 要】
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目的:研究非受体酪氨酸激酶c-Abl与Siva-1蛋白的相互作用及其对细胞凋亡的影响.方法:应用免疫共沉淀研究蛋白质相互作用;抗酪氨酸抗体研究蛋白体内磷酸化;体外激酶分析研究体
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;Dana Farber Cancer Institute, Harvard Medical School,MA 02115,USA
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目的:研究非受体酪氨酸激酶c-Abl与Siva-1蛋白的相互作用及其对细胞凋亡的影响.方法:应用免疫共沉淀研究蛋白质相互作用;抗酪氨酸抗体研究蛋白体内磷酸化;体外激酶分析研究体外磷酸化;流式细胞仪测定Sub G1细胞百分比以测定细胞调亡.结果:非受体酪氨酸激酶c-Abl在细胞内及体外均与Siva-1形成复合物,通过体外翻译的c-Abl结合实验表明其为直接的相互作用,其相互作用主要通过c-Abl的SH3结构域与Siva-1直接结合,且Siva-1可以被c-Abl磷酸化.通过c-Abl显性负突变结果表明,酪氨酸磷酸化对Siva-1诱导细胞凋亡至关重要.结论:c-Abl使Siva-1磷酸化可促进Siva-1的细胞凋亡功能.
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