大肠杆菌肉碱脱水酶基因的克隆、测序及高效表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhifeiji1
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目的 克隆并表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因。方法 用聚合酶链反应(PCR)从大肠杆菌K12s中扩增大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB,测定其DNA序列,将caiB基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET-28a(+)中,构建表达质粒pETCaiB,转化大肠杆菌BI21(DE3),用1mmol/L异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果 克隆得到的肉碱脱水酶编码基因caiB长度为1221bp,与文献报道值相比,DNA充列有26个不同,氨基序序列只有一个不同,即302位的丙氨酸变为苏氨酸,重组菌经IPT
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