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目的 构建EST3一EGFP融合蛋白穿梭载体并检测其表达。方法 重叠延伸PCR获取EST3一EGFP融合基因，克隆至pTriEx-4穿梭载体中，重组体转化至细菌Rosetta（De3）pLacI，诱导蛋白的表达，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达的融合蛋白；免疫印迹法检测重组蛋白的免疫学活性；荧光显微镜观察转化宿主细菌的发光活性。结果 成功构建了EST3EGFP重组体；融合蛋白主要分布于表达菌细胞质中；免疫印迹杂交检测表明重组蛋白具有EST3的免疫原性；诱导后的菌体在荧光显微镜下可见强烈的绿色荧光。结论