【摘 要】
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目的体外扩增弓形虫RH株信号转导蛋白14-3-3(Toxo 14-3-3)基因编码序列,构建原核表达质粒,并表达Toxo 14-3-3.方法收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取RNA,在设计合成的引物中引
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目的体外扩增弓形虫RH株信号转导蛋白14-3-3(Toxo 14-3-3)基因编码序列,构建原核表达质粒,并表达Toxo 14-3-3.方法收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取RNA,在设计合成的引物中引入EcoRI和XhoI酶切位点.应用RT-PCR扩增Toxo 14-3-3基因片段,插入原核表达质粒pET28a中,重组子双酶切、PCR和测序鉴定,转化大肠杆菌BL21并以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果从弓形虫RH株RNA中扩增出803 bp的Toxo 14-3-3基因片段,构建重组
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