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探讨敲减LncRNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及机制。
方法用FAP1-AS1 shRNA慢病毒感染结直肠癌细胞,实时荧光定量PCR检测AFAP1-AS1表达变化,免疫印迹法检测细胞中β-catenin、c-myc蛋白水平。用Wnt信号通路抑制剂处理敲减AFAP1-AS1的结直肠癌细胞,CCK8测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移,免疫印迹(Western blottingting)检测细胞中活化型Caspase-3(cleaved caspase-3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、活化型Caspase-9(cleaved caspase-9)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平。
结果FAP1-AS1 shRNA慢病毒感染可以明显下调结直肠癌细胞中FAP1-AS1表达水平。敲减FAP1-AS1后的结直肠癌细胞中β-catenin、c-myc蛋白水平下调,细胞增殖、侵袭、迁移能力降低,细胞凋亡增多,细胞中cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白水平升高,MMP-2、MMP-9蛋白水平下降(均P<0.05)。敲减FAP1-AS1及Wnt信号通路抑制剂处理后的结直肠癌细胞,细胞增殖、侵袭、迁移能力下降更显著,细胞凋亡水平更高,细胞中cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白水平显著上调,MMP-2、MMP-9蛋白水平显著下调(均P<0.05)。
结论敲减AFAP1-AS1能够通过抑制Wnt信号通路下调结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力并促进细胞凋亡。