【摘 要】
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<正> 近几年关于超低温保存植物组织培养物获得成功的报道,在国内多数是冷冻后产生愈伤组织,再诱导出植株。对于长期保存植物遗传资源而言,不仅要保持该材料的生命力,而且还
【机 构】
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中国农业科学院作物品种资源研究所,中国农业科学院作物品种资源研究所北京100081,北京100081
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<正> 近几年关于超低温保存植物组织培养物获得成功的报道,在国内多数是冷冻后产生愈伤组织,再诱导出植株。对于长期保存植物遗传资源而言,不仅要保持该材料的生命力,而且还要保持其遗传完整性。如果通过愈伤组织阶段,则有产生变异的可能。本试验草莓丛生芽冷冻后,恢复培养不经过愈伤组织阶段,直接产生丛生芽,获得新植株。草莓(Fragaria ananassa Duch.cv.印度卡)引自北京市林果所。取其茎尖,消毒培养。培养基成份为MS附加 BA2 ppm、IAA0.2ppm。培养温度20—25℃,光照15h,强度3500—4000lx,培养30—35天后长出丛生芽,继代培养1—2次,转入3—5℃冰箱预冷培养7—10天。预处理:将预冷培养后的丛生芽转入消毒的冷冻保护剂中,在冰箱3-5℃存放2—3 h。冷冻保护剂的成份是6％蔗糖、16％DMSO。冷冻和解冻:材料预处理后,用两种冷冻程序降温到—40℃,再投入液氮中保存。冷冻程序Ⅰ:在2℃停留60min,用2℃/min的速率降温到-20℃,改用0.5℃/min的速率降温到-43℃,投入液氮保存。冷冻程序Ⅱ:在2℃停留30min,用1℃/min的速率降温到-40℃,停留60min,再投入液氮中保存。材料在液氮中保存8天后取出,采用两种解冻方法解冻,即40—42℃温水中快速解冻和3—5℃冰箱内慢速解冻。解冻后的丛生芽,在上述培养基中再培养35—45天后,
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