新城疫病毒V4株NP基因的克隆、序列测定及真核表达载体的构建

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:imimim2
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研究新城疫病毒(NDV)核衣壳蛋白基因的生物学作用,以提纯的NDVV4株基因组RNA为模板,化学合成NP基因的特异核苷酸引物,RT-PCR扩增NP基因cDNA,得到一条1.5kb的DNA带,与NDVNP基因大小一致,平端连接克隆到pUC119质粒中.阳性克隆经酶切鉴定及序列分析表明已获得新城疫病毒V4株NP基因克隆.将NDVV4株NP基因碱基序列与已发表的NDVBeaudettecC株、LaSota株、D26株的NP基因的碱基序列比较,同源性分别为90.64%、90.17%、98.03%,氨基酸序列差异率是4.50%、5.93%、2.45%.NDVV4株NP基因与已发表的NDVBeaudettecC株、LaSota株、D26株的NP基因有所不同,但具有高度同源性.将NDVV4株NP基因cDNA克隆到pcDNA3真核表达载体中,构建表达NP蛋白真核质粒.
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