【摘 要】
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目的 探讨靶向沉默Sonic hedgehog(Shh)信号通路的转录因子Gli1基因表达对K562细胞增殖的影响及其机制.方法 将针对Gli1的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)通过脂质体(LipofectamineTM 2000)导入K562细胞作为实验组,并以非特异性siRNA为对照组.实时定量PCR和Western blot法检测Gli1 mRNA和蛋白
【机 构】
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潍坊市人民医院血液科,261000,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科,430030,武汉,华中科技大学同济医学
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目的 探讨靶向沉默Sonic hedgehog(Shh)信号通路的转录因子Gli1基因表达对K562细胞增殖的影响及其机制.方法 将针对Gli1的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)通过脂质体(LipofectamineTM 2000)导入K562细胞作为实验组,并以非特异性siRNA为对照组.实时定量PCR和Western blot法检测Gli1 mRNA和蛋白表达,MTT检测细胞增殖,碘化丙锭(PI)检测细胞周期,实时定量PCR检测c-myc、p21基因的表达变化.结果 转染后24 h实验组Gli1 mRNA表达水平为对照组的(52.60±3.57)%(P<0.01),转染后48 h实验组Gli1的蛋白表达水平为对照组的 (79.31±5.58)% (P<0.01).转染后24 h实验组细胞增殖率为对照组的 (94.41±3.58)% (P<0.05),48 h为对照组的(90.22 ±3.34)% (P<0.01).转染后24、48 h 实验组细胞出现G2/M期阻滞且c-myc的表达水平下降,而p21的表达水平升高 (P值均<0.05).结论 靶向沉默Gli1基因表达抑制了K562细胞的增殖,该抑制作用是通过下调c-myc基因、上调p21基因的表达实现的。
其他文献
目的 观察预防性G-CSF动员后供者淋巴细胞输注(pG-DLI)对高危白血病患者非清髓造血干细胞移植(NST)术后复发及移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法 12例高危白血病患者中Ph+急性淋巴细胞白血病(ALL)1例,ALL未缓解1例,伴中枢神经系统白血病的急性髓系白血病(AML)3例,AML未缓解1例,急性双表型白血病1例,骨髓增生异常综合征(MDS)转化的AML 2例,慢性髓性白血病(CM
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外逆转阿霉素(ADR)耐药细胞株K562/ADR细胞多药耐药(MDR)的作用,并探讨其机制.方法 健康人外周血单个核细胞经细胞因子体外诱导获得CIK,检测其表型和培养上清液细胞因子含量.实验组为CIK作用于K562/ADR细胞48 h后加入ADR;对照1组为CIK作用于K562/ADR细胞48 h,对照2组为ADR作用K562/ADR细胞48 h.采用M
部分骨髓增生异常综合征(MDS)患者在使用免疫抑制剂如环孢菌素A(CsA)、抗胸腺细胞球蛋白(ATG)后,血液学各项指标明显改善,临床症状大为好转,提示免疫抑制剂可清除引起无效造血的T细胞克隆,从而使患者达到持久的缓解状态.为进一步了解MDS患者T细胞的分布和克隆性,我们利用基因扫描技术分析T细胞受体(TCR)Vβ基因24个亚家族的CDR3,确定T细胞克隆性的方法,分析4例MDS患者外周血TCR
髓系肉瘤(Myeloid sarcoma,MS)是由原始粒细胞或不成熟的髓系细胞在髓外增生和浸润所形成的肿瘤性包块.若病变范围广泛,为多发性病灶,又无白血病表现,称之为髓系肉瘤病.根据2001年WHO关于淋巴造血组织肿瘤的分类,髓系肉瘤分为3种类型[1]:①粒细胞肉瘤(GS),最为常见,MS多数属于GS;②单核母细胞瘤,少见,主要由单核母细胞构成,常与单核细胞白血病相关;③由三系造血细胞,或主要由
患儿,男,5岁8个月.因"急性淋巴细胞白血病(ALL)缓解21个月,头痛5 d,发热3 d,间断抽搐9 h"入院;抽搐表现为大发作,解痉药控制效果不满意.患儿于22个月前在我院确诊为ALL,当时骨髓幼稚细胞0.960;白血病免疫分型为普通B淋巴细胞表型,白血病起病时免疫功能正常;脑脊液正常;按照我院ALL化疗方案规律治疗22个月,呈完全缓解骨髓象,鞘内注射化疗药物17次,期间查脑脊液常规、生化以及
患者,男,74岁.因"反复口腔血疱3个月伴右下肢肿胀2周"入院.入院体检:体温38.5 ℃,轻度贫血貌,咽部稍红,扁桃体无肿大;两肺呼吸音清,未闻及干、湿性啰音;心浊音界略向左扩大,脉率68次/min,律齐;腹部平软, 肝脾肋缘下未及;右下肢大腿内侧触及5 cm×6 cm肿块,质硬,皮温较高,轻压痛,边界清楚,无波动,表面皮肤完整,无破溃。
目的 探讨调节性T细胞和Thl7细胞在干扰素一1（IFN一y联合白消安诱导的新型小鼠重型再生障碍性贫血（AA）模型中的变化，从免疫学水平上论证该模型合理性。方法应用IFN一1腹腔注射联合白消安灌胃诱导建立BALB／c小鼠重型AA模型（联合组），以白消安组、IFN一-,／组和正常组为对照，分别收集各组小鼠的外周血和脾脏中的单个核细胞，采用流式细胞术检测各组小鼠外周血和脾脏中CIM’CD25’FOXP
以肺浆细胞瘤为首发表现的IgM型多发性骨髓瘤(MM)极为少见,近期我院收治1例,现报告如下.病例资料患者,男,55岁,已婚,因"阵发性咳嗽、乏力1个月余"于2013年1月11日入院.患者于2012年12月初开始无明显诱因出现阵发性咳嗽,痰黏、少,呈白色,伴乏力、胸痛,无发热、咯血、痰中带血等.在当地医院行胸部X线检查示:右中肺野外带可见斑片影;抗炎治疗效果不佳,为求进一步诊治来我院门诊,血常规检查
例1,男,42岁.因发热、皮肤出血点2个月于2009年9月9日入院.入院查体:体温38.5 ℃,中度贫血貌,全身皮肤黏膜可见散在出血点及瘀斑,颈部两侧、右侧腋窝、双侧腹股沟均可触及1～2枚约1 cm×1 cm肿大淋巴结,肿大淋巴结质韧,无压痛,局部无粘连、无破溃,边界清晰,活动度可.口唇苍白,齿龈肿胀、增生。
原发性骨髓纤维化(IMF)是一种原因不明的造血干细胞异常所致的慢性骨髓增殖性疾病,骨髓病理检查显示骨髓纤维组织增生,有髓外造血,外周血可见畸形红细胞及数量不一的幼稚粒细胞和红细胞,脾脏显著肿大。