【摘 要】
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根据基因库中鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒的基因序列,分别设计了两对特异性引物,通过对二重RT-PCR扩增条件的优化,研究建立了可同时鉴别检测鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒
【基金项目】
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国家百千万人才工程人选专项资金项目(945200603);广西特聘专家专项经费(2011B020);广西科技项目(桂科攻10100014-5和桂科专项11-3)共同资助
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根据基因库中鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒的基因序列,分别设计了两对特异性引物,通过对二重RT-PCR扩增条件的优化,研究建立了可同时鉴别检测鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重RT-PCR方法。该方法对同一样品中的鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒模板进行扩增,结果均同时得到2条大小与实验设计相符的202bp(鸭Ⅰ型肝炎病毒)和474bp(番鸭细小病毒)的特异性扩增条带,对鸭圆环病毒、鹅细小病毒、鸭副黏病毒、鸭瘟病毒和禽流感病毒等病原体的检测全为阴性。敏感性试验结果表明,该技术最低能检测到100fg的鸭Ⅰ型肝炎病毒RNA和番鸭细小病毒DNA。研究建立的鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重RT-PCR方法,具有快速、敏感、特异、定量和重复性好等优点,可用于临床上鸭Ⅰ型肝炎病毒和番鸭细小病毒感染的检测。
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