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目的在脱细胞异种(猪)真皮上培养角质形成细胞探讨体外复合皮的构建.方法取出生24 h内的SD大鼠全厚皮肤,采用低温酶消化法和密度梯度离心法分离获得纯角质形成细胞;以不用任何滋养层的角质形成细胞培养作为空白对照组,脱细胞异种真皮作为支架的角质形成细胞培养为实验组,原代培养后行气--液面培养.形态学,常规组织学HE染色观察,免疫组化染色(SABC法)检测复合皮肤中的Pancytokeratin和层粘连蛋白(Laminin).结果HE染色显示有4层以上的角质形成细胞和基底膜层形成,并有轻度角质化;免疫组化染色显示:Pancytokeratin(+),提示在脱细胞猪真皮上生长的为角质形成细胞;Laminin(+),提示培养的角质形成细胞产生了新的基底膜.结论体外培养的角质形成细胞能在脱细胞异种真皮上良好生长、存活,并有基底膜形成,在体外成功构建了具有表皮和真皮的复合皮,可以作为一种新的组织工程化皮肤.