【摘 要】
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目的探讨无功能垂体腺瘤中杀菌/渗透增强折叠家族蛋白B1(BPIFB1)基因的表达情况及其对垂体腺瘤增殖和侵袭性的影响。方法利用高通量基因表达(GEO)公共数据库垂体腺瘤芯片的数据，通过生物信息学分析方法筛选出侵袭性相关基因；然后选取5例侵袭性无功能垂体腺瘤和5例非侵袭性无功能垂体腺瘤的组织标本，通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色检测BPIFB1基因和蛋白的表达情况。在垂体腺瘤GH3细胞株中通
【机 构】
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目的探讨无功能垂体腺瘤中杀菌/渗透增强折叠家族蛋白B1(BPIFB1)基因的表达情况及其对垂体腺瘤增殖和侵袭性的影响。
方法利用高通量基因表达(GEO)公共数据库垂体腺瘤芯片的数据，通过生物信息学分析方法筛选出侵袭性相关基因；然后选取5例侵袭性无功能垂体腺瘤和5例非侵袭性无功能垂体腺瘤的组织标本，通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色检测BPIFB1基因和蛋白的表达情况。在垂体腺瘤GH3细胞株中通过siRNA敲减BPIFB1的表达，采用细胞活性和细胞划痕实验等检测肿瘤细胞的增殖和迁移能力；采用实时荧光定量PCR测定基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9 mRNA的表达水平；采用蛋白质免疫印迹技术检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。
结果生物信息学分析结果提示，侵袭性垂体腺瘤中BPIFB1的表达水平低于非侵袭性垂体腺瘤(log2FC＝-5.29，P<0.01)；免疫组织化学染色结果显示，侵袭性无功能垂体腺瘤中BPIFB1的表达水平(0.53±0.10)明显低于非侵袭性无功能垂体腺瘤(1.02±0.44)(P<0.05)；实时荧光定量PCR结果显示，BPIFB1 mRNA的表达水平与肿瘤Knosp分级呈负相关(rs＝-0.88，P<0.01)。细胞活性实验结果显示，BPIFB1敲减GH3细胞的细胞活性(2.98±0.14)高于正常GH3细胞(2.14±0.05)(P<0.01)；细胞划痕实验结果显示，BPIFB1敲减GH3细胞的迁移率[(43.82±3.74)%]高于正常GH3细胞[(17.53±2.05)%](P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示，BPIFB1敲减GH3细胞MMP-2和MMP-9 mRNA的表达水平均高于正常GH3细胞(均P<0.05)；蛋白质免疫印迹实验显示，BPIFB1敲减GH3细胞中EMT相关蛋白的表达水平与正常GH3细胞比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论侵袭性无功能垂体腺瘤中BPIFB1的表达水平降低，BPIFB1可能通过调控MMP的表达及EMT来抑制肿瘤的增殖和侵袭能力。
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