【摘 要】
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将编码人胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)成熟肽的cDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a(+)中构建表达质粒pET-EC-SOD,表达菌株用1mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达3h~5h
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,中国科学院上海生物化学研究所
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将编码人胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)成熟肽的cDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a(+)中构建表达质粒pET-EC-SOD,表达菌株用1mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达3h~5h后,产生较多的重组人EC-SOD,并形成包含体.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白质的26%以上.经纯化和复性后的EC-SOD比活为每毫克纯化酶蛋白1 200U.将EC-SOD cDNA基因插入昆虫杆状病毒供体质粒pFastBacHTb中,
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