【摘 要】
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用分子克隆技术构建人gdnf基因打靶牛β-casein基因座的正负筛选打靶载体，用于制备生产人GDNF的牛乳腺生物反应器。打靶载体以牛β-casein基因上游和下游5．7kb序列为5’和3’同
【机 构】
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内蒙古大学哺乳动物生殖与生物学技术教育部重点实验室
【基金项目】
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国家高科技“863”项目子课题(2005AA206110);内蒙古大学特聘教授科研启动费资助项目(203059)
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用分子克隆技术构建人gdnf基因打靶牛β-casein基因座的正负筛选打靶载体，用于制备生产人GDNF的牛乳腺生物反应器。打靶载体以牛β-casein基因上游和下游5．7kb序列为5’和3’同源臂；neo抗性基因为正筛选因子；HSV-tk基因和DsRed2基因为双负筛选因子；人gdnf基因置于5’同源臂下游，SV40 polyA序列插入到人gdnf基因下游作为人gdnf基因转录终止信号。经PCR、限制性内切酶图谱及DNA测序分析鉴定，结果表明已成功地构建了人gdnf基因打靶牛β-casein基因座的正负筛
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