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目的
为了使鉴别呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV) A、B亚型的方法更为简单、特异、有效。
方法根据RSV G蛋白编码基因的核苷酸序列设计一套引物,其中P1为亚型间通用的引物,P2和P3分别为A、B亚型特异性引物。将这些引物用于同一逆转录-聚合酶链(RT-PCR)反应,A、B亚型株的扩增产物分别为277 bp和863 bp,根据PCR产物的大小即可鉴别所测毒株的亚型。用这一方法对RSV原型株和9株我国分离株进行亚型鉴定。
结果分离株8株为A亚型,1株为B亚型,分型结果与单克隆抗体检测和基因序列分析完全相符。
结论RT-PCR方法鉴别呼吸道合胞病毒亚型具有快速、简便、敏感、特异等特点,适用于RSV临床标本的亚型分型及流行病学研究。