适合水稻悬浮培养细胞蛋白质组分析的双向电泳技术

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水稻是研究植物蛋白质组学的一个重要试材,从蛋白质的提取,裂解缓冲液的成份和浓度,第一向聚焦的条件,蛋白上样量和二向胶的选择方面,对水稻悬浮培养细胞的双向电泳条件进行了比较和优化.结果表明,采用甲醇/氯仿沉淀蛋白,裂解缓冲液中加入0.5%的两性电解质、并加入盐桥,17 cm的胶条、850 μg的上样量可达到较好的等电聚焦效果;8%-16%梯度胶分离蛋白较为适宜.
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