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目的 探讨转化生长因子β1 (TGF-β1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化为心肌样细胞的影响.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSCs,应用2、5、10、15 μg/L TGF-β1对第2代BMSCs定向诱导,相差显微镜观察细胞形态变化,应用免疫细胞化学技术检测诱导后4周BMSCs结蛋白(desmin)、α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及心肌连接蛋白43 (Cx43)的表达情况.根据cTnT心肌源性特异性标记物的阳性率分析心肌样细胞的转化率；应用激光扫描共焦显微镜技术,检测诱导后4周BMSCs α-SCA、cTnT的表达；以半定量RT-PCR方法在诱导后7、21和28d检测心肌转录调节因子(GATA4)和心肌特异性α-肌球蛋白重链(α-MHC)的表达.结果 1.不同浓度TGF-β1诱导后的BMSCs,其形态在不同的时间段存在差异.15μg/L组和2μg/L组诱导7d的BMSCs形态变化不明显,与对照组类似,随后则逐渐转变成长柱形；5μg/L组诱导后的BMSCs于7d时形态已转变成类长柱形,28d时细胞体积则变小,呈条索状排列；10μg/L组诱导后的BMSCs类似于5μg/L组,但细胞数量相对较少.2.不同浓度TGF-β1诱导4周后的BMSCs均可见desmin、α-SCA及Cx43的阳性细胞,其中5μg/L组的阳性率均最强.各诱导组与对照组desmin、α-SCA及Cx43的阳性率差异均具有显著性(P＜0.05).3.各诱导组cTnT均有阳性表达.根据cTnT阳性率计算出的心肌样细胞转化率在5μg/L组最高,显著高于2μ g/L组(P=0.028)和15μ g/L组(P =0.000),但与10μg/L组之间差异不显著(P＞0.05).此外,各诱导组的心肌样细胞转化率均显著高于对照组(P＜0.01).4.激光扫描共焦显微镜技术检测结果显示,经TGF-β1诱导4周的BMSCsα-SCA和cTnT蛋白均定位于细胞质且呈共表达.5.RT-PCR结果显示,GATA-4于诱导后7d弱表达,21d表达增强,28d表达减弱；α-MHC在诱导后7d不表达,21d弱表达,28d表达明显.结论 TGF-β1可以诱导BMSCs获得心肌分化表型,最佳诱导浓度是5μg/L.