【摘 要】
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目的 探讨小干扰RNA(siRNA)对大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28基因表达及干扰后的T细胞的功能的影响.方法 设计针对目标基因的siRNA,转染大鼠T淋巴细胞,逆转录-聚合酶链反应((RT-PCR)方法检测CD28 mRNA水平,MLR检测转染后的T淋巴细胞的增殖能力,ELISA法检测细胞因子水平.结果 siRNA转染大鼠T淋巴细胞后,抑制CD28分子的表达,半定量RT-PCR检测显示T淋巴细
【机 构】
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150086,哈尔滨医科大学附属第二临床医学院,150086,哈尔滨医科大学附属第二临床医学院,150086,哈尔滨医科大学附属第二临床医学院,150086,哈尔滨医科大学附属第二临床医学院
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目的 探讨小干扰RNA(siRNA)对大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28基因表达及干扰后的T细胞的功能的影响.方法 设计针对目标基因的siRNA,转染大鼠T淋巴细胞,逆转录-聚合酶链反应((RT-PCR)方法检测CD28 mRNA水平,MLR检测转染后的T淋巴细胞的增殖能力,ELISA法检测细胞因子水平.结果 siRNA转染大鼠T淋巴细胞后,抑制CD28分子的表达,半定量RT-PCR检测显示T淋巴细胞CD28的mRNA均有明显的下降,siRNA转染48 h后,siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3、siRNA-4组CD28基因表达均受到抑制,其抑制率最高为(88.56±4.70)%,T细胞增殖能力、IL-2,IFN-γ水平明显低于对照组.结论 siRNA可以特异性抑制大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28基因的转录和表达,降低大鼠T细胞的增殖能力,抑制了IL-2,IFN-γ细胞因子的分泌水平。
其他文献
在人类找到某种用于治疗糖尿病的方法之前,胰岛素替代仅是一种维持患者生命的方法.使用胰岛素治疗1型糖尿病(T1DM),并不能阻止其并发症[1].相比之下,β细胞替代治疗(包括胰腺移植和胰岛移植)能够为T1DM患者提供健康的胰腺组织,达到生理性调控胰岛素分泌,维持正常血糖.而胰腺移植手术的复杂性和围手术期的致残率以及高额费用,使人们难以接受其作为T1DM的常规治疗方法.自2000年加拿大Edmonto
目的 探讨血管移植后联合应用c-myc和增殖细胞核抗原(PCNA)反义寡核苷酸(AODN)抑制血管平滑肌增殖和防止移植血管狭窄的作用.方法选40只新西兰雄性白兔,随机分为对照组(A组)、c-myc-AODN组(B组)、PCNA-AODN组(C组)和c-myc-AODN加PCNA-AODN组(D组),每组10只;将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0cm)对换移植,移植血管用c-myc-AODN和PC
目的 探讨骨髓基质干细胞(MSCs)向胶质瘤迁徙的能力及其分布模式.方法 应用纳米超顺磁性氧化铁粒子(SPIO)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双重标记大鼠MSCs,Transwell系统定量分析MSCs的迁徙能力.将标记的MSCs经静脉注射入胶质瘤荷瘤大鼠体内,普鲁士蓝和荧光染色检测MSCs靶向颅内胶质瘤迁移的分布模式.结果 与生理盐水或正常脑组织溶解物比较,F98胶质瘤细胞和F98胶质瘤溶解物
自从1898年Pratt首次提出逆行心肌灌注(逆灌)以来,逆灌的心肌保护效果已被证实[1],并且已经广泛应用于心外科手术.但是相同灌注流量下逆灌与顺行灌注(顺灌)对于毛细血管流量、局部灌注以及能量代谢的影响尚未被充分证实。
目的 比较不同脑灌注方法对深低温停循环(DHCA)中脑组织温度、温差的影响,以及与自由基及脑皮质超微结构改变的关系,评价不同灌注方式的脑保护效果.方法 健康成年杂种犬15只,随机分为3组(n=5).Ⅰ组单纯行DHCA,Ⅱ组DHCA+RCP,Ⅲ组DHCA+选择性顺行脑灌注(SACP).转流降温至鼻咽部温18℃时停循环,期间Ⅱ、Ⅲ组分别行逆行脑灌注(RCP)及SACP,90 min后复温,再灌注90
目的 观察CD147在兔VX2模型肿瘤组织及癌旁组织的表达,并与人肝癌组织进行比较.方法 标本分为肿瘤组,癌旁组,人肝癌组(每组数n=10).应用免疫组织化学三步法(S-P)对比CD147在细胞的定位和表达,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肿瘤组与癌旁组的CD147 mRNA的表达差异,应用免疫印迹(Western blot)蛋白半定量法,对比肿瘤组和肝癌组CD147蛋白量的表达水平.
早期生长反应基因-1(Egr-1)启动子可由电离辐射诱导,使得转导基因的表达可从时间与空间上进行调控[1],由此驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(TK)在胰腺癌细胞中高效表达,提高杀伤胰腺癌细胞的效率,本研究旨在观察辐射调控下的自杀基因的腺病毒载体在胰腺癌细胞中的表达。
目的 检测RAB5A、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在大肠癌组织中不同部位的表达及两者之间的相互关系。方法应用免疫组织化学SP法对46例大肠癌组织、距癌灶3cm的癌旁组织和23例非肿瘤患者大肠组织中RAB5A和MMP-9进行检测。结果46例大肠癌组织中。RAB5A蛋白的表达阳性率为100％（46／46），阳性表达位于胞质和胞膜；MMP-9的表达阳性率73．91％（34／46），阳性表达位于胞质。
目的 观察下肢深静脉血栓形成(DVT)患者中性粒细胞黏附分子,炎症因子及抗炎因子水平变化,探讨炎症反应在下肢DVT中的作用.方法 抽取40例下肢DVT患者及30例健康对照者外周血,分别以流式细胞仪技术检测中性粒细胞CD11b/CD18及CD62L表达,放射免疫法检测血清白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,酶免法检测IL-10水平.结果 下肢DVT患者中性粒细胞CD11
目的 探讨p53突变型人类乳腺癌细胞系MDA-MB-436中,p73对细胞周期抑制因子14-3-3σ的调节作用.方法 采用多种不同的实验方法,测定基因转染前后两种细胞系中p53、p73基因以及14-3-3σ基因表达状况.结果 阿霉素作用24、48 h后,MCF-7的细胞生存率分别是50.20%、16.58%,MDA-MB-436为99.20%、98.62%(P＜0.01);在MDA-MB-436中