【摘 要】
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目的:孤儿核受体NR4A1是核受体超家族中的一员,其广泛分布于不同的细胞类型并参与多种生物学过程的调控。探讨在卵泡膜细胞中NR4A1对甾体激素生成酶的转录及雄激素生成的影响
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院生殖医学科江苏省生殖医学重点实验室
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目的:孤儿核受体NR4A1是核受体超家族中的一员,其广泛分布于不同的细胞类型并参与多种生物学过程的调控。探讨在卵泡膜细胞中NR4A1对甾体激素生成酶的转录及雄激素生成的影响。方法:构建小鼠NR4A1重组腺病毒载体AdCMV-NR4A1及AdH1-NR4A1,重组病毒感染卵泡24 h后,蛋白质印迹(Western Blot)验证NR4A1在卵泡膜细胞中的超表达及干涉效果。实时定量反转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)检测Nr4a1超表达及干涉后对雄激素生成酶(Star,Cyp11a1,Cyp17a1,Hsd3b2)的转录调节,放射免疫法测定培养液中睾酮的浓度。结果:AdCMV-NR4A1感染卵泡膜细胞后NR4A1蛋白的表达水平显著升高。NR4A1在卵泡膜细胞内超表达后明显促进Star,Cyp11a1,Cyp17a1,Hsd3b2的转录,增加睾酮合成。相反,AdH1-NR4A1感染卵泡膜细胞后,NR4A1蛋白的表达水平显著降低。NR4A1干涉后明显抑制Star,Cyp11a1,Cyp17a1,Hsd3b2的表达,降低睾酮的合成。此外,在卵泡培养液中加入cAMP/PKA通路激动剂———福斯高林后,Nr4a1的表达迅速增加,随后Star,Cyp11a1,Cyp17a1,Hsd3b2的表达增加。结论:核受体NR4A1在卵泡膜细胞内促进雄激素生成酶的转录,进而调节雄激素生成。该研究为进一步探讨NR4A1在多囊卵巢综合征高雄激素血症等病理生理改变中的分子调控机制奠定了基础。
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