人红细胞胰岛素受体自身磷酸化的酶联免疫吸附测定

来源 :中华内分泌代谢杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hxzhou618
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目的建立人红细胞胰岛素受体自身磷酸化测定法。方法应用合成的磷酸酪氨酸钥孔帽贝血蓝蛋白(PYKLH)免疫家兔得到抗血清,将纯化的抗磷酸酪氨酸抗体作为第一抗体,羊抗兔Ig酶结合物(辣根过氧化物酶标记)作为第二抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定法。结果批内变异系数为8.4%,批间变异系数为9.0%。20例健康人的红细胞IR的自身磷酸化活性,测定值为0.150±0.022nmolPY/mg受体蛋白。在体外,胰岛素在10-6mol/L时对自身磷酸化达到最大激活。结论用酶免法测定人红细胞胰岛素受体灵敏、特异、简便,为胰岛素作用机制的理论研究、胰岛素受体基因突变的检测和糖尿病及其它胰岛素抵抗综合症的病因及治疗的探讨提供了有效的方法。
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