苯并(a)芘代谢产物作用下人胚肺细胞热应激蛋白70表达与DNA损伤

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目的 探讨苯并 (a)芘 (BaP)代谢产物作用下 ,人胚肺细胞HSP70表达与DNA损伤的关系。方法 选用正常人胚肺 (HEL)二倍体细胞 ,进行如下处理 :一般处理组 ,以 0、10、5 0、10 0、2 0 0μmol/LBaP染毒 3h(体外经大鼠肝S9 mix活化诱导 ) ,单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤情况 ;热应激组 ,细胞预热应激 (4 1℃ 1h ,37℃ 2h) ,再以同样浓度的BaP染毒 3h ,采用Westernblot和单细胞凝胶电泳技术检测HSP70表达与DNA损伤情况。结果 一般处理组BaP在 5 0 μmol/L时可引起HEL细胞DNA的明显损伤 ,且随BaP染毒剂量增加 ,DNA损伤级别加重 ;接受预热应激的细胞经不同浓度BaP染毒 3h后 ,与对照组比 ,HSP70表达水平降低 ,BaP在 10 μmol/L时可见明显的DNA损伤 ,随染毒剂量的增加 ,DNA损伤级别加重 ,但在最高剂量组 2 0 0 μmol/L时 ,损伤减轻。与一般处理组比 ,发生“ + +”级DNA损伤的细胞减少 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;“ + + +”级DNA损伤程度差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 HSP70对BaP引起的HEL细胞DNA损伤的保护作用不明显 ,可能与预热应激后BaP染毒使HSP70表达受到抑制有关。
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