【摘 要】
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目的 探讨Notch1对喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2细胞周期、细胞凋亡及细胞迁移能力的影响,并研究其可能的分子作用机制.方法 将细胞分为对照组、空载体组和Notch1组,通过CCK-8增
【机 构】
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郑州人民医院口腔科,郑州大学第一附属医院口腔科
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目的 探讨Notch1对喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2细胞周期、细胞凋亡及细胞迁移能力的影响,并研究其可能的分子作用机制.方法 将细胞分为对照组、空载体组和Notch1组,通过CCK-8增殖实验和流式细胞术检测Notch1对细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,采用Boyden小室体外迁移实验检测Notch1对Hep-2细胞迁移的影响,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及细胞迁移相关分子表达的变化.结果 与对照组和空载体组比较,Notch1组中Hep-2细胞增殖受到明显抑制(P＜0.05).Notch1组中G0/G1期细胞的比例[ (70.43±1.36)％]明显高于对照组[(46.39±1.19)％]和空载体组[(48.41±1.18)％],差异有统计学意义(P=0.000).Notch1组的细胞凋亡率[(22.46±0.90)％]明显高于对照组[(5.77±0.37)％]和空载体组[(6.09±0.20)％],差异有统计学意义(P=0.000).Notch1组的穿膜细胞数为(41.75±6.13)个,与对照组[(113.63±7.19)个]和空载体组[(110.89±6.37)个]相比,明显减少(P＜0.05).半定量RT-PCR和Western blot检测结果显示,细胞增殖抑制和细胞周期阻滞与细胞周期蛋白D1( cyclin D1)、cyclin E和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)表达的下调以及p53表达的上调密切相关.Notch1表达上调介导的细胞凋亡与半胱天冬酶(caspase)3和caspase 9表达上调和Bcl-2表达下调有极其密切的联系,而Hep-2迁移能力的降低与基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达下调明显相关.结论 Notch1信号途径可能在喉鳞状细胞癌的发生发展中具有十分重要的作用,有望成为喉鳞状细胞癌治疗的分子靶点.
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