【摘 要】
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目的：在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1（hIGF-1）。方法：根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1DNA序列,构建表达载体,
【机 构】
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郑州大学生物工程系,河南富邦药业有限公司
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目的：在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1（hIGF-1）。方法：根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1DNA序列,构建表达载体,在大肠杆菌OrigamiB（DE3）中与硫氧还蛋白TrxA融合表达,并通过盐析和镍柱亲合层析进行纯化。结果：SDS-PAGE分析显示,重组融合蛋白以可溶形式存在,分子量约为28kDa,占上清总蛋白的50%以上。经盐析和镍柱亲合层析进行纯化,目标蛋白纯度可达到90%左右。结论：复合干扰素在大肠杆菌中的高效可溶表达。
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