【摘 要】
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[目的]为了进一步明确青稞核糖体蛋白基因HbRPL11的功能[方法]根据鉴定得到的青稞核糖体蛋白基因HbRPL11的序列设计了引物,从青稞幼嫩叶片的cDNA中得到目的片段,并对目的基因
【机 构】
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西藏自治区农牧科学院农业研究所;省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室
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[目的]为了进一步明确青稞核糖体蛋白基因HbRPL11的功能[方法]根据鉴定得到的青稞核糖体蛋白基因HbRPL11的序列设计了引物,从青稞幼嫩叶片的cDNA中得到目的片段,并对目的基因序列进行了测序鉴定和序列分析,同时构建了原核表达载体pET28a(+)-RPL11,转化入大肠杆菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导外源蛋白质表达并利用SDS-PAGE凝胶电泳检测.[结果]成功扩增出了青稞核糖体蛋白基因HbRPL11的CDS全长序列,得到了重组蛋白.[结论]青稞核糖体蛋白基因HbRPL11的CDS全长序列大小为543 bp.经生物信息学分析,HbRPL11编码的蛋白质含有181个氨基酸,相对分子质量为24KD,理论等电点(pI)为5.17,总平均亲水性(GRAVY)为0.766,不稳定系数为37.67为稳定蛋白.重建蛋白质三维结构表明该蛋白包含14个β-片状螺旋结构存在典型的核糖体蛋白L5结构域.系统进化分析表明,HbRPL11与小麦和山羊草的RPL11具有较近的亲缘关系.蛋白表达结果显示,重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中.
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