【摘 要】
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为进一步研究杜仲糖基转移酶结构和功能提供科学依据,利用贵州省农业生物工程重点实验室构建的杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)基因组数据库注释信息,从杜仲克隆得到1个全长
【机 构】
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贵州大学茶学院,山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室/贵州省农业生物工程重点实验室
【基金项目】
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贵州省科学技术基金项目“杜仲松柏醇糖基转移酶基因EuCGT表达特征及功能验证”[黔科合J字(2015)2042],国家自然科学基金项目“杜仲松脂醇双糖苷生物合成关键蛋白DIRIGENT编码基因的克隆与功能分析”(31660076),贵州省教育厅青年成长项目“杜仲ABC转运蛋白基因克隆与表达分析”[黔教科KY(2016)126]
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为进一步研究杜仲糖基转移酶结构和功能提供科学依据,利用贵州省农业生物工程重点实验室构建的杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)基因组数据库注释信息,从杜仲克隆得到1个全长为1 461bp的糖基转移酶(glycosyltransferase,GT)cDNA序列,将该基因命名为EuGT4;利用基因重组技术构建原核表达载体pET30a-EuGT4,遗传转化大肠杆菌BL21(DE3);在37℃条件下,以终浓度为0.2mM的异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导16h,并采用镍-亚氨基二乙酸(
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