【摘 要】
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目的：探讨miR-99b-5p靶向Tribbles同源蛋白1（Tribbles pseudokinase 1,TRIB1）基因调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡。方法：采用RT-PCR检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达水平，采用Western blotting检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中TRIB1蛋白表达量。在MCF-7
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81172497,81260396）； 湖南省研究生科研创新项目（CX2018B709）；
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目的：探讨miR-99b-5p靶向Tribbles同源蛋白1（Tribbles pseudokinase 1,TRIB1）基因调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡。方法：采用RT-PCR检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达水平，采用Western blotting检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中TRIB1蛋白表达量。在MCF-7细胞中转染miR-99b-5p mimics或mimics对照，分别记为miR-99b-5p组和miR-NC组，RT-PCR检测细胞中miR-99b-5p表达变化，Western blotting检测TRIB1蛋白表达量，MTT法检测细胞增殖能力，AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡水平，双荧光素酶报告基因实验检测miR-99b-5p和TRIB1的靶向关系。结果：与人乳腺上皮细胞HBL-100比较，乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量明显降低（P＜0.01）,而TRIB1蛋白的表达明显升高（P＜0.01）。与miR-NC组比较，miR-99b-5p组MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量升高（P＜0.05）,TRIB1蛋白表达水平降低（P＜0.05）,细胞增殖能力减弱（P＜0.05）,细胞凋亡率升高（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因检测实验结果显示，miR-99b-5p能够明显降低TRIB1-Wt MCF-7细胞相对荧光素酶活性（P＜0.01）,而对TRIB1-Mut MCF-7细胞相对荧光素酶活性无明显影响（P＞0.05）。结论：miR-99b-5p在乳腺癌MCF-7细胞中呈低表达，TRIB1蛋白呈高表达，过表达miR-99b-5p能够靶向抑制TRIB1阻碍MCF-7细胞增殖并促进细胞凋亡。
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