【摘 要】
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依照猪IFN-γ基因序列设计引物,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a,构建pET-30a-pIFN-γ重组表达载体,转化入寄主菌BL21（DE3）,经PCR、双酶切、测序鉴定正确后,用IPTG进行诱导
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所,新疆农业大学动物医学院
【基金项目】
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国家高科技研究发展计划“863”项目（2006AA10A207）,甘肃省重大科技专项（ZGS063-A43-013）.
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依照猪IFN-γ基因序列设计引物,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a,构建pET-30a-pIFN-γ重组表达载体,转化入寄主菌BL21（DE3）,经PCR、双酶切、测序鉴定正确后,用IPTG进行诱导表达,可溶性的表达产物分别经镍柱和Sephadex-G100纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化,然后进行SDS-PAGE、Western-blot分析,并用细胞病变抑制法进行重组猪IFN-γ活性测定.结果表明：试验得到了高纯度的重组pIFN-γ,且纯化的重组猪IFN-γ蛋白具有较
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