【摘 要】
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目的 观察金黄色葡萄球菌外毒素及中件粒细胞对视网膜色素卜皮(RPE)细胞的毒性作用.方法 分离人外周血L中性粒细胞,和人RPE细胞株D407(RPE D407)共培养,并加入金黄色葡萄球菌
【机 构】
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中山人学中山眼科中心,广州市花都区人民医院眼科
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目的 观察金黄色葡萄球菌外毒素及中件粒细胞对视网膜色素卜皮(RPE)细胞的毒性作用.方法 分离人外周血L中性粒细胞,和人RPE细胞株D407(RPE D407)共培养,并加入金黄色葡萄球菌ATCC29213外毒素建立细菌性眼内炎体外模型.通过观察RPE细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、流式细胞仪分析RPE细胞存活状况改变、以及Hoechst 33342/Propidium Iodide(P1)染色观察细胞核的荧光染色等方法,验证金黄色葡萄球菌外毒素及中性粒细胞对RPE细胞的损伤作用.结果 金黄色葡萄球菌外毒素单独作用RPE细胞时,细胞外LDH水平及RPE细胞的坏死细胞比率随着外毒素剂量增加而升高,但仪250、500 μl组差异有统计学意义.当加入中性粒细胞共同培养后,100μl外毒素作用下,仪6 h,RPE细胞外LDH水平即高于无外毒素组,差异具有统计学意义;在6 h时,流式细胞仪分析显示,RPE细胞发生了明显的细胞凋亡,并且随着中性粒细胞数量增多而加剧,差异具有统计学意义.结论 金黄色葡萄球菌外毒素对RPE细胞具有毒性作用,其机制主要以细胞坏死的方式进行.中性粒细胞超过一定数量后对RPE细胞具有损伤作用.外毒素和中性粒细胞共同参与时,对RPE细胞的毒性作用大丁两者单独对RPE细胞的损害.
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