【摘 要】
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目的探讨短发卡RNA(shRNA)干扰沉默骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因对宫颈癌细胞株HeLa化疗敏感性的影响及其可能机制。方法 OPNshRNA真核表达质粒pGCsi3.0在脂质体介导下转染
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目的探讨短发卡RNA(shRNA)干扰沉默骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因对宫颈癌细胞株HeLa化疗敏感性的影响及其可能机制。方法 OPNshRNA真核表达质粒pGCsi3.0在脂质体介导下转染HeLa细胞(shOPN组),以转染空载质粒的细胞(shNon组)和未转染细胞(Con组)作为对照。分别用0、0.5、1、2μg/mL顺铂和0、50、100、500nmol/L紫杉醇处理各组细胞24h,流式细胞术检测细胞凋亡。蛋白质印迹分析检测下调OPN表达后细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bcl-xL、Bcl-2和Bax表达的变化。结果 2μg/mL顺铂处理后shOPN组细胞凋亡率为(44.53±2.78)%,与shNon组[(15.34±2.18)%]和Con组[(15.37±1.03)%]比较差异有统计学意义(P<0.05)。500nmol/L紫杉醇处理后shOPN组细胞凋亡率为(51.46±1.49)%,与shNon组[(19.16±1.87)%]和Con组[(17.03±2.37)%]比较差异有统计学意义(P<0.05)。下调OPN表达后顺铂对cleaved caspase-3的活化作用增强(P<0.01),同时抗凋亡蛋白Bcl-xL、Bcl-2的表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调。结论 OPN沉默后可通过促进宫颈癌HeLa细胞的凋亡进而增强细胞对化疗药物的敏感性,OPN的RNA干扰可能成为一种新的治疗策略应用于宫颈癌的新辅助化疗。
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