【摘 要】
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目的 研究二氯乙腈(DCAN)对人肝肿瘤HepG2细胞凋亡的作用及其机制. 方法 用二甲基亚砜(DMSO)溶解DCAN,以DMSO处理的HepG2细胞作为对照组,50和800 μmol/L的DCAN处理的HepG2细
【机 构】
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广东医科大学公共卫生学院,东莞市环境医学重点实验室,广东东莞523808
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目的 研究二氯乙腈(DCAN)对人肝肿瘤HepG2细胞凋亡的作用及其机制. 方法 用二甲基亚砜(DMSO)溶解DCAN,以DMSO处理的HepG2细胞作为对照组,50和800 μmol/L的DCAN处理的HepG2细胞作为处理组,采用CellCounting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞活力,流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布情况,Annexin V-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率;荧光测定法检测HepG2细胞内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性. 结果 DCAN处理浓度和处理时间存在交互效应(P＜0.001),与对照组比较,DCAN可明显抑制HepG2增殖,呈现时间和剂量效应(P＜0.05);与对照组比较,800 μmol/L DCAN处理组G0/G1期比例明显减少,G2/M期细胞比例明显增加;DCAN诱导的HepG2细胞凋亡随着浓度的增加而增加,呈剂量-效应关系,回归方程为(y)=0.031x+5[决定系数(R2)=0.915,F=64.782,P＜0.001];DCAN诱导的HepG2细胞内caspase-3酶活性随着处理浓度的增加而增加,呈剂量-效应关系,回归方程为(y)=0.001 6x+1(R2=1.000,F=21 266.064,P＜0.001). 结论 DCAN可抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与G2/M期细胞阻滞、抑制RNA和蛋白质的合成并激活细胞内caspase-3凋亡途径有关.
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