【摘 要】
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从鸡胚原代细胞CEF中扩增出鸡HMGB1基因,构建重组原核表达质粒pET-28a-chHMGB1,并将pET-28a-chHMGB1转入大肠杆菌BL21(DE3)中,于37℃进行诱导表达,经SDS-PAGE分析表明该重组
【基金项目】
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国家自然科学基金(31372421和31530074),公益性行业(农业)科研专项(201303033)
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从鸡胚原代细胞CEF中扩增出鸡HMGB1基因,构建重组原核表达质粒pET-28a-chHMGB1,并将pET-28a-chHMGB1转入大肠杆菌BL21(DE3)中,于37℃进行诱导表达,经SDS-PAGE分析表明该重组蛋白可以在大肠杆菌中高效表达且以可溶性蛋白的形式存在。蛋白通过Ni-NAT纯化树脂亲和纯化,并作为免疫原制备鼠抗chHMGB1多克隆抗体血清。该多克隆抗体同时具有ELISA、Westernblot和IFA效价,且特异性识别禽源细胞内HMGB1蛋白。
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