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[目的]本研究以火鸡疱疹病毒（HVT）BAC分子克隆为平台，构建表达禽流感HA基因的重组火鸡疱疹病毒，以开发新型病毒活载体疫苗。[方法]利用Red/ET重组技术，经过两步法重组：第一步，用两端带有50bp大小左、右同源臂a和b的选择标记基因rpsL-neo表达盒替换HVT基因组US2区；第二步，用两端带有同样的50 bp左、右同源臂a和b的HA基因表达盒替换选择标记基因rpsL-neo表达盒。在含有氯霉素和链霉素双抗性的平板上筛选阳性克隆，经卡那霉素抗性反向筛选和PCR进一步鉴定，鉴定正确的克隆命名为pH