【摘 要】
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根据NDV HN蛋白已知基因序列设计一对引物,以提取的澳大利亚布里斯班NDV分离株B95基因组RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增得到一条约1.9 kb的条带.将扩增产物克隆到PGEM-T-easy
【机 构】
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河北农业大学动物科技学院,中国农科院上海家畜寄生虫病研究所
【基金项目】
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上海市科技兴农重点攻关项目，河北省自然科学基金
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根据NDV HN蛋白已知基因序列设计一对引物,以提取的澳大利亚布里斯班NDV分离株B95基因组RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增得到一条约1.9 kb的条带.将扩增产物克隆到PGEM-T-easy载体中,并对重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,结果证明我们得到了HN基因的阳性重组子,随后采用Sanger's双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定,获得该基因全长序列,并进行同源性分析.B95株与其他毒株核苷酸同源性为95.1%～87%,氨基酸同源性为96.1%～92.1%.
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