【摘 要】
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目的 建立基于16S rDNA快速鉴定细菌的PCR测序方法.方法 通过一组16S rDNA通用引物扩增得到基因组全长,PCR产物经纯化后直接测序分析.利用BLAST软件从GenBank数据库中搜索相
【机 构】
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华兰生物工程股份有限公司研发中心,河南新乡 453003华兰基因工程有限公司质量控制部,河南新乡 453000;
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目的 建立基于16S rDNA快速鉴定细菌的PCR测序方法.方法 通过一组16S rDNA通用引物扩增得到基因组全长,PCR产物经纯化后直接测序分析.利用BLAST软件从GenBank数据库中搜索相关菌株的16S rDNA全序列,采用Clustal X软件进行多序列比对和同源性分析,确定细菌的种属.结果 实验利用引物建立了16S rDNA全长序列分析方法,未知菌种和已知菌株通过PCR方法获得约1500bp的全长序列.比对分析已知菌株测序结果与预期标准序列完全一致,证实建立的PCR方法结果可靠.利用建立的PCR法,对实验室从污染物中分离得到不同未知菌株进行鉴定,成功确定了这些菌株的种属.结论 建立的基于16S rDNA的PCR方法是可行的,可快速准确地检测及鉴定细菌种类,尽早发现细菌污染,对污染制品输注后的针对性治疗方面具有潜在的应用价值.
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