【摘 要】
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目的 比较两种不同荧光标记的PIK3CA siRNA体外转染特性,筛选出转染效率高、抗淬灭能力强的PIK3CA siRNA.方法 利用脂质体Lipofectamine 2000转染两种荧光标记PIK3CA siRNA及阴性对照siRNA人胃癌细胞BGC-823,倒置荧光显微镜观察其荧光分布和淬灭情况,并通过Image J软件分析其转染效率.实时定量PCR检测不同荧光标记的PIK3CA siRNA对
【机 构】
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510095广东省广州,广州医学院附属肿瘤医院实验中心,510095广东省广州,广州医学院附属肿瘤医院实验中心,510095广东省广州,广州医学院附属肿瘤医院实验中心,510095广东省广州,广州医学
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目的 比较两种不同荧光标记的PIK3CA siRNA体外转染特性,筛选出转染效率高、抗淬灭能力强的PIK3CA siRNA.方法 利用脂质体Lipofectamine 2000转染两种荧光标记PIK3CA siRNA及阴性对照siRNA人胃癌细胞BGC-823,倒置荧光显微镜观察其荧光分布和淬灭情况,并通过Image J软件分析其转染效率.实时定量PCR检测不同荧光标记的PIK3CA siRNA对靶mRNA表达的影响.结果 相同转染条件下,两种荧光标记的PIK3CA siRNA转染效率及抗淬灭能力不同.Cy3或FAM标记的PIK3CA siRNA与阴性对照siRNA转染效率无明显差异,但Cy3标记的PIK3CA siRNA与阴性对照siRNA转染效率较FAM标记的明显升高(P＜0.05).Cy3标记的PIK3CA siRNA对靶mRNA的抑制作用明显高于FAM标记的PIK3CA siRNA(P＜0.05).结论 Cy3标记PIK3CA siRNA可以起到良好的示踪作用,为进一步构建Cy3标记PIK3CA siRNA纳米粒子提供了重要的实验依据。
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