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摘要[目的]建立同时测定辣椒中敌敌畏、乙酰甲胺磷、治螟磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、乐果、水胺硫磷8种有机磷农药残留的QuEChERS-气相色谱分析方法。[方法]样品用乙腈进行超声提取，无水硫酸镁盐析后， 提取液经N-丙基乙二胺（PSA）、C18和石墨化炭黑（GCB）进行分散固相萃取净化，火焰光度檢测器（FPD）进行分析测定， 外标法定量。[结果]8种有机磷农药的检出限范围为0.001～0.008 mg/kg，6次进样相对标准偏差小于5%， 平均回收率范围为83.5%～101.2%。[结论]该方法前处理操作简单， 检测的重复性好、精密度高，可满足对辣椒中多种有机磷农药残留的同时分析。
关键词辣椒；有机磷农药残留；QuEChERS；气相色谱法
中图分类号S481+.8文献标识码
A文章编号0517-6611（2017）30-0094-02
Abstract[Objective]To establish a QuEChERS gas chromatography method for determination of 8 kinds of organophosphorus pesticide residues in chilis.[Method] The samples were extracted by acetonitrile， anhydrous magnesium sulfate was used for salting out， then cleaned up by dispersive solid phase extraction combining with GCB 、C18 and PSA.Samples were analyzed by FPD detector.External standard was used as quantitive method.[Result]The detection limits were bewteen 0.001-0.008 mg/kg and the average recoveries were ranged from 83.5%-101.2%， the relative standard deviation（RSD）of 8 kinds of organophosphorus pesticide residues were below 5%.[Conclusion]The method is simple，quick， easy and effective for the determination of chilis.
Key wordsChilis；Organophosphorus pesticide residues；QuEChERS；Gas chromatography
辣椒的果实因果皮含有辣椒素而有辣味，能增进食欲。辣椒中维生素C的含量在蔬菜中居第1位。作为人们日常生活中常用的蔬菜和调味剂，辣椒种子油可食用，果实亦有驱虫和发汗之功效[1-2]。辣椒和其他蔬菜一样，在种植过程中需喷洒多种农药，有可能引起农药残留量超标，严重影响辣椒及其产品的质量，给人们的健康带来很大的风险。因此，辣椒中农药残留的检测对于人们的健康保障具有重要的现实意义。当前，农药残留检测标准用的最多的是农业部 NY/T 761—2008的检测方法[3]，所用仪器为气相色谱和液相色谱。随着色谱技术的发展，色谱-质谱联用技术也越来越多地用于农药残留的检测[4-5]。李玉美等[6]、李海畅等[7]研究了同时检测辣椒中氯氰菊酯和溴氰菊酯残留的方法，但同时检测辣椒中有机磷农药残留的方法鲜见报道。QuEChERS 法是由美国学者Seven J.Lehotay等于2002年提出的农药多残留快速提取方法，笔者采用QuEChERS 处理方式，用气相色谱-火焰光度检测（GC-FPD）测定新鲜的朝天椒、小指椒和灯笼椒中有机磷农药残留量，为辣椒的评价提供参考依据[8-9]。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1主要仪器。
安捷伦7890A气相色谱仪带有FPD检测器；DB-1701毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm，250 μm）；梅特勒XS205DH电子天平；台式高速冷冻离心机（湖南湘仪）；安谱QuEChERS萃取包（硫酸镁和乙酸钠）；QuEChERS净化管[硫酸镁、N-丙基乙二胺（PSA）、石墨化碳黑（GCB）和C18]。
1.1.2主要试剂。敌敌畏、乙酰甲胺磷、治螟磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、乐果、水胺硫磷标准品（100 μg/mL），均购自农业部环境保护科学研究所；乙腈、甲苯为色谱纯。
1.2方法
1.2.1色谱条件。
进样口温度200 ℃；检测器温度250 ℃；不分流； 载气为氮气；氢气流量30 mL/min；空气流量300 mL/min；柱流量1.5 mL/min；柱温：100 ℃保持1 min，以15 ℃/min升至200 ℃，保持1 min，然后以10 ℃/min升温到230 ℃，保持12 min。
1.2.2测定方法。
1.2.2.1标准溶液的配制。准确移取100 μg/mL的敌敌畏、乙酰甲胺磷、治螟磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、乐果、水胺硫磷标准品溶液适量，用乙腈稀释至10 μg/mL的混标储备溶液，摇匀，备用。用10 μg/mL的混标溶液配制成0.02～0.20 μg/mL的标液制作标准曲线。
1.2.2.2试样制备。将朝天椒、小指椒和灯笼椒3种辣椒样品粉碎，用搅拌机充分搅匀，待用。
提取：准确称取 15.0 g 已粉碎好的样品放入 25 mL 离心管中，加入15 mL 1%的乙酸乙腈混合液，旋涡混合 1 min，快速加入提取包（MgSO4、NaAcetate），适当旋涡混合后超声20 min，以5 000 r/min 离心6 min。净化：取 6 mL 离心好的上清液于装有分散固相萃取剂（QuEChERS 净化试剂盒：含有1.2 g MgSO4+400 mg PSA+400 mg GCB+400 mg C18）的 15 mL 离心管中（加入2 mL甲苯），旋涡混匀 3 min，以5 000 r/min 离心 6 min。取离心好的上清液 2 mL于玻璃试管中，用氮吹仪吹至近干，乙腈定容至 1 mL，最后用 0.2 μm 滤膜过滤。
2结果与分析
2.1标准色谱图该试验根据色谱保留时间定性，8种有机磷农药的标准色谱图如图1所示。
2.4标准曲线
用乙腈作溶剂，准确配制成含量为0.02～0.20 μg/mL的8种有机磷农药混合标准溶液。按以上的条件进行试验， 8种有机磷农药线性范围内线性关系良好，相关系数（r2） > 0.99； 以仪器3倍噪声值表示方法的检出限，在该色谱条件下，8 种农药的检出限在0.001 ～0.008 mg/kg。
2.5精密度及回收率
该试验条件下，在灯笼椒样品中分别添加0.02、0.04、0.08 μg/mL 3个浓度的混标液，每个浓度的样品重复测定6次，结果如表2所示。
3结论
采用缓冲QuEChERS法提取， 利用气相色谱火焰光度法可以快速测定辣椒中8种有机磷农药残留。该方法快速、准确， 仪器和试验条件要求不高， 分别对新鲜的朝天椒、小指椒和灯笼椒中有机磷农药残留量进行了测定，建立了完全满足辣椒中有机磷类农药残留量的分析方法，可为辣椒的农药残留评价提供一定的参考。
参考文献
[1]
戴雄泽，刘志敏.初论我国辣椒产业的现状及发展趋势[J].辣椒杂志，2005（4）：1-6.
[2] 金春洁，陈文生，高祥，等.油辣椒中有机氯残留量的毛细管气相色谱测定方法[J].贵州农业科学，2013，41（2）： 181-183.
[3] 农业部环境质量监督检验测试中心（天津），农业部环境保护科研监测所.蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定：NY/T 761—2008[S].北京：中国农业出版社，2008.
关键词辣椒；有机磷农药残留；QuEChERS；气相色谱法
中图分类号S481+.8文献标识码
A文章编号0517-6611（2017）30-0094-02
Abstract[Objective]To establish a QuEChERS gas chromatography method for determination of 8 kinds of organophosphorus pesticide residues in chilis.[Method] The samples were extracted by acetonitrile， anhydrous magnesium sulfate was used for salting out， then cleaned up by dispersive solid phase extraction combining with GCB 、C18 and PSA.Samples were analyzed by FPD detector.External standard was used as quantitive method.[Result]The detection limits were bewteen 0.001-0.008 mg/kg and the average recoveries were ranged from 83.5%-101.2%， the relative standard deviation（RSD）of 8 kinds of organophosphorus pesticide residues were below 5%.[Conclusion]The method is simple，quick， easy and effective for the determination of chilis.
Key wordsChilis；Organophosphorus pesticide residues；QuEChERS；Gas chromatography
辣椒的果实因果皮含有辣椒素而有辣味，能增进食欲。辣椒中维生素C的含量在蔬菜中居第1位。作为人们日常生活中常用的蔬菜和调味剂，辣椒种子油可食用，果实亦有驱虫和发汗之功效[1-2]。辣椒和其他蔬菜一样，在种植过程中需喷洒多种农药，有可能引起农药残留量超标，严重影响辣椒及其产品的质量，给人们的健康带来很大的风险。因此，辣椒中农药残留的检测对于人们的健康保障具有重要的现实意义。当前，农药残留检测标准用的最多的是农业部 NY/T 761—2008的检测方法[3]，所用仪器为气相色谱和液相色谱。随着色谱技术的发展，色谱-质谱联用技术也越来越多地用于农药残留的检测[4-5]。李玉美等[6]、李海畅等[7]研究了同时检测辣椒中氯氰菊酯和溴氰菊酯残留的方法，但同时检测辣椒中有机磷农药残留的方法鲜见报道。QuEChERS 法是由美国学者Seven J.Lehotay等于2002年提出的农药多残留快速提取方法，笔者采用QuEChERS 处理方式，用气相色谱-火焰光度检测（GC-FPD）测定新鲜的朝天椒、小指椒和灯笼椒中有机磷农药残留量，为辣椒的评价提供参考依据[8-9]。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1主要仪器。
安捷伦7890A气相色谱仪带有FPD检测器；DB-1701毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm，250 μm）；梅特勒XS205DH电子天平；台式高速冷冻离心机（湖南湘仪）；安谱QuEChERS萃取包（硫酸镁和乙酸钠）；QuEChERS净化管[硫酸镁、N-丙基乙二胺（PSA）、石墨化碳黑（GCB）和C18]。
1.1.2主要试剂。敌敌畏、乙酰甲胺磷、治螟磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、乐果、水胺硫磷标准品（100 μg/mL），均购自农业部环境保护科学研究所；乙腈、甲苯为色谱纯。
1.2方法
1.2.1色谱条件。
进样口温度200 ℃；检测器温度250 ℃；不分流； 载气为氮气；氢气流量30 mL/min；空气流量300 mL/min；柱流量1.5 mL/min；柱温：100 ℃保持1 min，以15 ℃/min升至200 ℃，保持1 min，然后以10 ℃/min升温到230 ℃，保持12 min。
1.2.2测定方法。
1.2.2.1标准溶液的配制。准确移取100 μg/mL的敌敌畏、乙酰甲胺磷、治螟磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、乐果、水胺硫磷标准品溶液适量，用乙腈稀释至10 μg/mL的混标储备溶液，摇匀，备用。用10 μg/mL的混标溶液配制成0.02～0.20 μg/mL的标液制作标准曲线。
1.2.2.2试样制备。将朝天椒、小指椒和灯笼椒3种辣椒样品粉碎，用搅拌机充分搅匀，待用。
提取：准确称取 15.0 g 已粉碎好的样品放入 25 mL 离心管中，加入15 mL 1%的乙酸乙腈混合液，旋涡混合 1 min，快速加入提取包（MgSO4、NaAcetate），适当旋涡混合后超声20 min，以5 000 r/min 离心6 min。净化：取 6 mL 离心好的上清液于装有分散固相萃取剂（QuEChERS 净化试剂盒：含有1.2 g MgSO4+400 mg PSA+400 mg GCB+400 mg C18）的 15 mL 离心管中（加入2 mL甲苯），旋涡混匀 3 min，以5 000 r/min 离心 6 min。取离心好的上清液 2 mL于玻璃试管中，用氮吹仪吹至近干，乙腈定容至 1 mL，最后用 0.2 μm 滤膜过滤。
2结果与分析
2.1标准色谱图该试验根据色谱保留时间定性，8种有机磷农药的标准色谱图如图1所示。
2.4标准曲线
用乙腈作溶剂，准确配制成含量为0.02～0.20 μg/mL的8种有机磷农药混合标准溶液。按以上的条件进行试验， 8种有机磷农药线性范围内线性关系良好，相关系数（r2） > 0.99； 以仪器3倍噪声值表示方法的检出限，在该色谱条件下，8 种农药的检出限在0.001 ～0.008 mg/kg。
2.5精密度及回收率
该试验条件下，在灯笼椒样品中分别添加0.02、0.04、0.08 μg/mL 3个浓度的混标液，每个浓度的样品重复测定6次，结果如表2所示。
3结论
采用缓冲QuEChERS法提取， 利用气相色谱火焰光度法可以快速测定辣椒中8种有机磷农药残留。该方法快速、准确， 仪器和试验条件要求不高， 分别对新鲜的朝天椒、小指椒和灯笼椒中有机磷农药残留量进行了测定，建立了完全满足辣椒中有机磷类农药残留量的分析方法，可为辣椒的农药残留评价提供一定的参考。
参考文献
[1]
戴雄泽，刘志敏.初论我国辣椒产业的现状及发展趋势[J].辣椒杂志，2005（4）：1-6.
[2] 金春洁，陈文生，高祥，等.油辣椒中有机氯残留量的毛细管气相色谱测定方法[J].贵州农业科学，2013，41（2）： 181-183.
[3] 农业部环境质量监督检验测试中心（天津），农业部环境保护科研监测所.蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定：NY/T 761—2008[S].北京：中国农业出版社，2008.