【摘 要】
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目的:利用RNA干扰技术抑制人胆囊癌GBC-SD细胞中上皮细胞黏附分子(EP-CAM)基因的表达,探讨抑制EP-CAM基因后对GBC-SD细胞增殖、凋亡的影响.方法:构建靶向EP-CAM基因的miRNA重
【基金项目】
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安徽高等学校省级自然科学研究项目;
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目的:利用RNA干扰技术抑制人胆囊癌GBC-SD细胞中上皮细胞黏附分子(EP-CAM)基因的表达,探讨抑制EP-CAM基因后对GBC-SD细胞增殖、凋亡的影响.方法:构建靶向EP-CAM基因的miRNA重组质粒,转染GBC-SD细胞,用RT-PCR和Western Blot分别检测EP-CAM基因的mRNA及蛋白的表达情况,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果:靶向EP-CAM的miRNA重组质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-EPCAM-1构建成功,重组质粒能显著抑制靶基因EP- CAM的mRNA及蛋白表达.与对照组比较,干扰后的细胞凋亡率无明显变化(P＞0.05),但细胞增殖活性受到明显抑制(P＜0.05).结论:靶向EP-CAM基因的miRNA重组质粒能有效抑制EP-CAM基因的表达,抑制GBC-SD细胞的增殖.
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