【摘要】 目的:测定散寒活络丸中5-o-甲基维斯阿米醇苷含量。方法:反相高效液相色谱法。结果:5-o-甲基维斯阿米醇苷在32.32μg～193.92μg范围内呈良好的线性关系r=0.9999,平均回收99.53%,RSD=1.61%(n=6)。结论:该方法简便、快速、重现性好,能够有效的控制散寒活络丸的内在质量。
　　【关键词】 5-o-甲基维斯阿米醇苷;高效液相色谱仪;含量测定
　　【中图分类号】 R28【文献标识码】 B【文章编号】 1007-8517(2009)24-0086-01
　　
　　1 材料与方法
　　1.1 仪器与试药
　　仪器:美国waters 2695高效液相色谱仪,日本岛津UV-2450紫外-可见分光光度计,METTLER AE100百万分之一天平,METTLER AE240十万分之一天平,超声数控清洗仪。
　　试剂:甲醇为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。
　　对照品:5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品批号:111523-200404
　　色谱条件:色谱柱:Diamonsil(钻石) C18(4.6×250mm,5μm);流动相:甲醇—水(35:65);流速:1.0ml/min;柱温:30℃;检测波长:290nm;进样量:10μl。
　　检测波长的选择:取5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液,在190nm-700nm波长范围内进行光谱扫描,5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品在290nm处有最大吸收,故确定检测波长为290nm。
　　对照品溶液的制备:精密称取5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品3.232mg,加甲醇制成每1ml含16.16μg的溶液,即得。
　　供试品溶液的制备:取重量差异项下的本品,剪碎,取约3g,精密称定,再精密加入硅藻土3g,研匀,精密称取3g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,超声处理1小时,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液过微孔滤膜(0.45nm),即得。
　　阴性对照溶液的制备:按本处方量的十分之一量,除防风外取各味药材,同供试品同工艺制备阴性样品,同供试品溶液的制备,即得。
　　2 结果
　　2.1 方法学考察
　　2.1.1 专属性试验 取阴性空白样品,同供试品溶液制备阴性供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μl,注入液相色谱仪。试验结果表明,阴性供试品溶液在与对照品色谱相同保留时间处无对应峰,表明该方法其他组分对5-o-甲基维斯阿米醇苷无干扰。
　　2.1.2 稳定性试验 精密吸取白城多邦药业有限公司(批号20070101)供试品溶液,按拟定色谱条件在0～48小时内测定,结果见表1。
　　试验结果表明48小时内供试品溶液中5-o-甲基维斯阿米醇苷的含量较稳定。
　　
　　表1
　　稳定性试验结果
　　时间(h)048122448RSD(%) 峰面积2203822214752199132204282210482210420.26
　　
　　2.1.3 准确度试验 取已知含量的供试品(白城多邦药业有限公司20070101,含量为0.42mg/g)9g,精密称定,精密加入硅藻土9g,研匀,分别精密称取1.5g,置具塞锥形瓶中,各精密加入甲醇50ml,再分别精密加入对照品溶液(0.331mg/ml)1ml,密塞,称定重量,超声处理1小时,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,测定,计算回收率,结果见表2。
　　
　　表2
　　加样回收试验结果
　　NO取样
　　量样品
　　含量加入对
　　照品量测得
　　总量回收
　　率平均
　　回收率RSD11.50100.31530.3310.63295.6721.50060.31530.3310.648100.5131.50190.31550.3310.64699.8499.531.6141.54320.32420.3310.663102.35
　　
　　如表3所示,试验结果表明本法回收率较好,准确度较高。
　　2.2 样品的含量测定 取本品3.0g,精密称定,按拟定的含量测定方法制备供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液(0.016mg/ml)与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定并计算含量,结果见表3。