NMHC Ⅱ A在前列腺癌转移中的作用及lncRNA调控轴筛选

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目的 研究NMHCⅡA在前列腺癌转移中的作用并筛选其相关lncRNA调控轴。方法 使用Oncomine数据库分析前列腺癌中NMHCⅡA编码基因MYH9的mRNA表达水平。通过Western bolt检测良性前列腺增生细胞系BPH-1、前列腺癌细胞系PC3及其高转移型亚细胞系PC3M中NMHCⅡA的蛋白表达水平。构建沉默NMHCⅡA的PC3M细胞,筛选稳定感染细胞株,使用Western bolt及细胞免疫荧光染色鉴定沉默效果。CCK-8检测法测定细胞增殖能力,Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。R语言筛选TCGA数据库中前列腺癌转录组数据,得到异常表达的lncRNA和miRNA并配对;miRcode、miRDB和Targetscan数据库在线预测靶向MYH9的miRNA,比对在线预测结果与TCGA数据库筛选结果,得到共有的miRNA,并根据lncRNA与miRNA配对结果明确miRNA上游的lncRNA,进而推测lncRNA/miRNA/MYH9调控轴。结果 Oncomine数据库分析显示,MYH9在前列腺癌组织中的表达高于正常前列腺组织(P<0.05)。Western bolt结果证明与BPH-1相比,NMHCⅡA在前列腺癌细胞PC3以及PC3M细胞中表达增高(P<0.05)。shMYH9 PC3M细胞的NMHCⅡA表达水平显著低于无感染组和空载组(P<0.05)。shMYH9 PC3M细胞增殖能力显著低于无感染组和空载组(P<0.05),迁移和侵袭能力也明显低于空载组与无感染组(P<0.05)。数据库筛选结果显示,KIAA0087/miR-133b/MYH9、HNF1A-AS1/miR-133b/MYH9和CACNA1C-IT3/miR-133b/MYH9轴可能在前列腺癌中发挥调节NMHCⅡA的作用。结论 NMHCⅡA可能通过靶向前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力调节前列腺癌的转移;KIAA0087/miR-133b/MYH9、HNF1A-AS1/miR-133b/MYH9和CACNA1C-IT3/miR-133b/MYH9这3条调控轴可能调控NMHCⅡA。
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