抗TfR单链抗体-AP融合蛋白的构建、表达与鉴定

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目的构建、表达和鉴定抗转铁蛋白受体(TfR)单链抗体——碱性磷酸酶(AP)融合蛋白。方法用SfiⅠ和NotⅠ分别酶切抗转铁蛋白受体scFv表达质粒pUC19/119,获得scFv基因,直接亚克隆到表达载体pDAP2中,在TG1菌中表达scFv—AP融合蛋白,SDS—PAGE分析scFv-AP的分子量,酶免疫测定鉴定其抗体和酶活性。结果scFv—AP融合蛋白表达载体经scFv特异性引物PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳可见约700bp条带,符合scFv基因理论值大小,IPTG诱导产物经SDS—PAGE分析
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