【摘 要】
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目的 研究低切应力(low shear stress,LowSS)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移功能异常在动脉粥样硬化血管重建病理过程中的作用及其分子机制.
【基金项目】
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上海市青年科技启明星计划;国家自然科学基金资助项目
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目的 研究低切应力(low shear stress,LowSS)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移功能异常在动脉粥样硬化血管重建病理过程中的作用及其分子机制.方法 应用双向凝胶电泳结合质谱分析的差异蛋白质组学方法,研究1.5 Pa正常切应力(normal shear stress,NSS)与0.5 Pa LowSS条件下培养血管组织的蛋白质差异表达谱.应用血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)与VSMCs联合培养的平行平板流动腔系统,分别施加NSS和LowSS,Western blot检测ECs与VSMCs的Rab28表达水平以及VSMCs的磷酸化ERK表达水平;Transwell 法检测VSMCs的迁移能力;RNA干扰和PD98059分别特异性抑制VSMCs的Rab28表达和ERK磷酸化,再观察VSMCs迁移能力变化.结果 血管差异蛋白质组学的结果发现,与NSS组相比,Rab28在LowSS组血管组织的表达水平明显升高.细胞实验结果显示,LowSS加载明显上调VSMCs的Rab28蛋白表达、VSMCs迁移和ERK磷酸化.静态条件下RNA干扰抑制单独培养VSMCs的Rab28表达,VSMCs迁移能力明显降低,但ERK磷酸化水平无明显变化;应用PD98059特异性抑制VSMCs的ERK磷酸化,VSMCs迁移能力和Rab28表达水平均明显降低.结论 LowSS可能通过上调VSMCs的ERK磷酸化水平引起Rab28表达水平增加,从而诱导VSMCs迁移.探讨Rab28及其相关信号通路在切应力调控VSMCs功能中的作用及其机制,可能为深入理解动脉粥样硬化血管重建疾病发病机制和寻找新的药物治疗靶点提供力学生物学依据.
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