【摘 要】
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目的 研究三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞恶性生物学行为的影响并探讨自噬在其中的作用.方法 用0.1μmol/L As2O3处理人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2细胞,建立稳定的慢性As2O3诱导细胞系.平板克隆实验、软琼脂集落形成实验和Transwell实验分别用于检测上述慢性As2O3诱导肝癌细胞及其对照细胞的增殖、克隆形成和迁移能力.As2O3处理细胞后,Western blot检测自噬相关蛋白LC3B和p62表达的影响,免疫荧光检测观察细胞中LC3B表达水平受As2O3处理的影响.SMMC
【机 构】
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安庆医药高等专科学校生理教研室,安庆 246052
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目的 研究三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞恶性生物学行为的影响并探讨自噬在其中的作用.方法 用0.1μmol/L As2O3处理人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2细胞,建立稳定的慢性As2O3诱导细胞系.平板克隆实验、软琼脂集落形成实验和Transwell实验分别用于检测上述慢性As2O3诱导肝癌细胞及其对照细胞的增殖、克隆形成和迁移能力.As2O3处理细胞后,Western blot检测自噬相关蛋白LC3B和p62表达的影响,免疫荧光检测观察细胞中LC3B表达水平受As2O3处理的影响.SMMC-7721和HepG2细胞经As2O3和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)单独或联合处理后,检测细胞增殖和迁移能力.结果 与对照组相比,经0.1μmol/L As2O3慢性诱导的SMMC-7721和HepG2细胞的增殖能力、克隆形成和迁移能力受到抑制.As2O3处理的SMMC-7721和HepG2细胞中,p62水平升高,LC3B-II/LC3B-I有不同程度的升高,并呈时间依赖性.免疫荧光检测亦显示As2O3处理的肝癌细胞中LC3B表达更强.As2O3与3-MA联合处理组细胞的增殖和迁移能力较As2O3单独处理组强.结论 As2O3诱导肝癌细胞自噬失调,并可抑制其增殖、克隆形成和迁移能力.自噬抑制剂3-MA处理可逆转As2O3对肝癌细胞增殖和迁移的抑制作用.As2O3可能通过诱导肝癌细胞自噬而抑制其增殖、迁移能力.
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