口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shilinjun2000
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试验通过对口蹄疫病毒核苷酸序列的比对分析,在O型口蹄疫病毒的P1基因保守区,设计1对特异性引物,应用均匀设计法优化反应参数,建立口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法。对该法进行特异性试验、敏感性试验检测。结果表明,该二温式RT-PCR方法只对口蹄疫O型病毒敏感,对其他血清型的口蹄疫病毒及常见的猪病病毒均不敏感;扩增条带与预期目的片段大小相符,扩增片段经克隆、测序发现与引物所在基因序列的同源性为100%;检测病毒RNA的敏感性为1.665pg/μL,其敏感性与三步法PCR敏感性检测结果没有差异。运用该法
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