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目的重组及表达人附睾上皮分泌蛋白4(HFA)的融合蛋白,为建立一种新的卵巢癌的诊断方法奠定基础。方法提取人卵巢壶细胞株SKOV3中总RNA,应用RT-PCR技术扩增出HFA基因,将其与PUCm—T载体连接,转化入3X)P10菌中进行克隆并测序鉴定。进一步构建PET28a—HE4表达体系,用异丙基.阻D-硫代半乳糖苷(IP他)诱导,最终在BL21菌中表达HE4融合蛋白(含有His—Tag),并进行SDS-PAGE及westernblot鉴定。结果SKOV3细胞株提取的RNA经RT-PCR扩增后得到一条400