SiRNA干扰结肠癌转移相关基因1表达对卵巢癌顺铂化疗耐药性的影响

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目的:利用RNA干扰技术抑制结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)在顺铂(cisplatin,DDP)耐药的卵巢癌细胞株SKOV-3/DDP中的表达,并探讨其对DDP化疗耐药性的影响。方法:RNA干扰分为3组,空白对照组为未经处理的SKOV-3/DDP细胞,阴性对照组为空质粒转染的SKOV-3/DDP-shVector细胞,实验组为MACC1-shRNA重组质粒转染的SKOV-3/DDP-shMACC1细胞。反转录PCR法和蛋白质印迹法检测稳定转染后SKOV-3/DDP细胞中MACC1 mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测细胞对DDP的耐药性变化,FCM法检测细胞凋亡变化。结果:相比于未转染组SKOV-3/DDP细胞,MACC1-shRNA转染组SKOV-3/DDP-shMACC1细胞中MACC1的mRNA及蛋白水平均明显下调[下调百分率分别为(83.39±1.26)%和(82.25±2.94)%,P<0.05]。DDP对SKOV-3/DDP-shMACC1细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值与未转染组和空质粒转染组细胞的IC50值比较,均明显降低[(26.09±0.91)μmol/L vs(47.50±0.40)μmol/L和(47.08±0.45)μmol/L,P<0.05]。SKOV-3/DDP-shMACC1细胞凋亡率明显提高[(13.77±0.60)%vs(3.63±0.30)%和(4.23±0.30)%,P<0.05]。结论:RNA干扰抑制MACC1基因表达能增强卵巢癌耐药细胞SKOV-3/DDP对DDP的敏感性。
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