【摘 要】
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在对人A33基因5＇调控区初步研究的基础上,进一步采用体外足迹法、电泳迁移率变更分析(EMSA)和定点突变等实验对A33启动子的-104～+25 bp区域进行了重点研究.在A33启动子的-104～+2
【机 构】
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北京大学医学部生物化学与分子生物学系
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在对人A33基因5＇调控区初步研究的基础上,进一步采用体外足迹法、电泳迁移率变更分析(EMSA)和定点突变等实验对A33启动子的-104～+25 bp区域进行了重点研究.在A33启动子的-104～+25 bp区域内存在两个转录正调控元件,它们分别位于转录起始位点上游-86～-68区(A)和-40～-19区(B).通过对转录因子数据库的查找,发现A区与转录因子GKLF(gut-enrichedKrüppel-like factor)的结合位点吻合,而B区则没有找到与之相应的转录因子.EMSA实验表明,A区与核蛋白的结合存在组织特异性,而B区的结合则无组织特异性.推测A区所包含的顺式调控元件很可能是决定A33基因组织特异性表达的关键元件.根据B区所处的位置和富含AT来分析,它极有可能是和通用转录因子及RNA聚合酶结合的区域.A和B两个区域的点突变都可使A33启动子的活性丧失85%以上.
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