丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在肝癌细胞生物学功能中的作用

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目的

检测丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP)在肝癌细胞及正常肝组织中的表达,并探索其对肝癌细胞生物学功能的影响。

方法

通过检测九种肝癌细胞株及正常肝组织STRAP相对表达量,并分别在肝癌细胞株HepG2、SNU449中构建STRAP过表达及敲减细胞株。使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白印迹技术检测细胞株构建后STRAP表达,用Transwell小室及含有基质胶的Transwell小室检测肝癌细胞的迁移和侵袭能力,并使用细胞计数试剂盒(CCK-8)及细胞克隆形成实验检测STRAP对肝癌细胞增殖能力的影响,并利用流式细胞学技术检测STRAP对肝癌细胞凋亡的影响。

结果

肝癌细胞株中STRAP表达水平明显高于正常肝组织;在肝癌细胞中STRAP敲减后,敲减组与对照组mRNA相对表达量分别为(0.17±0.19)、(2.22±1.02),敲减组表达水平明显低于对照组(P<0.05)。过表达STRAP基因后,过表达组与对照组mRNA相对表达量分别为(3.25±0.39)、(1.05±0.37),过表达组明显高于对照组(P<0.01)。STRAP基因敲减后,SNU449细胞克隆形成实验对照组和敲减组细胞克隆数目分别为(221.30±9.60)、(58.30±4.49),迁移实验对照组和敲减组细胞穿膜数分别为(0.76±0.04)、(0.44±0.06),侵袭实验对照组和敲减组细胞穿膜数分别为(1.11±0.05)、(0.60±0.05),细胞增殖实验敲减组在第72、96、120小时,细胞增殖数目较对照组下降,细胞凋亡实验对照组和敲减组细胞凋亡比例分别(4.11±0.12)、(11.73±0.40),细胞的克隆形成能力、迁移侵袭能力及增殖能力明显受抑制(P<0.05),细胞凋亡明显增多(P<0.01);SRTAP基因过表达后,HepG2细胞在第48、72、96、120小时,细胞增殖数目较对照组增多,细胞增殖能力明显增强(P<0.01),细胞凋亡实验对照组和过表达组细胞凋亡比例分别(8.87±0.12)、(8.34±0.06),细胞凋亡明显受抑制(P<0.05)。

结论

STRAP在肝癌细胞中呈高表达,并且起着促进肝癌细胞增殖、增强肝癌细胞迁移侵袭能力,同时抑制肝癌细胞凋亡的作用。

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