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目的:研究登革2型病毒NGC株(DEN2)感染人血管内皮细胞(HUVEC)后对HUVEC自噬的影响。方法:采用免疫组织化学法检测Ⅷ因子表达,鉴定HUVEC,50%组织细胞感染量(TCID50)测定DEN2 NGC株对白纹伊蚊C6/36细胞的毒力,实时荧光定量PCR检测感染DEN2的HUVEC中病毒mRNA表达水平的变化,Western-blot检测DEN2感染对HUVEC自噬标记性蛋白LC3B表达的影响,激光共聚焦显微镜观察DEN2感染HUVEC自噬现象。结果:免疫组织化学法结果显示,细胞表达Ⅷ因子,符合HUVEC特点;接种DEN2后5～7 d C6/36细胞出现肿胀、融合、产生空泡等典型的细胞病变,TCID50为10-5. 6;随着感染DEN2量增加,HUVEC中DEN2 mRNA相对表达量呈上升趋势,在加入1×104TCID50病毒量时DEN2 mRNA相对表达量最高(P <0. 05);用巴伐洛霉素A1(Baf)抑制后,与未用Baf相比,相同TCID50 DEN2感染HUVEV后DEN2 mRNA表达减少(P <0. 05)。Western-blot结果显示,与空白对照组比较,1×102、1×103、1×104TCID50 DEN2感染组LC3BⅡ/Ⅰ比值升高,LC3BⅡ、Ⅰ条带灰度值增加(P <0. 05);用Baf抑制后,与未用Baf相比,1×102、1×103、1×104TCID50DEN2感染组LC3BⅡ/Ⅰ比值上高,LC3BⅡ、Ⅰ条带灰度增加(P <0. 05)。激光共聚焦扫描显微镜检测结果显示,在正常HUVEC胞浆内有LC3B(绿色荧光)及LAMP1(红色荧光),荧光融合后绿色、红色荧光重叠;用Baf抑制后,HUVEC胞浆内绿色红色荧光强度增加,荧光融合后绿色、红色荧光重叠部分减少;与正常HUVEC相比,1×104TCID50 DEN2感染组HUVEC胞浆内可观察到绿色、红色及橘黄色荧光(DEN2 NS1),绿色、红色荧光强度增加,在荧光融合后绿色、红色与橘黄色荧光重叠。结论:HUVEC在DEN2感染后24 h,随着感染量增加,病毒载量增加,加Baf抑制后DEN2增殖被抑制; DEN2感染HUVEC后,在胞浆内DEN2 NS1与LC3B、溶酶体标记蛋白LAMP1共定位; DEN2可诱导HUVEC自噬增强,Baf可抑制DEN2感染HUVEC自噬的发生。